Для прорастания семян орхидей и дальнейшего развития их зародышей необходима специальная «желейная» субстанция, обогащённая сахаром и различного рода питательными веществами — ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА.
Основой любой питательной среды является АГАР-АГАР — это продукт, полученный из очищенных, хорошо высушенных и измельчённых в пыль красный и бурых водорослей (Gracilaria, Gelidium, Ceramium и др.). В сухом виде агар-агар представляет собой желтоватый порошок, который растворяется в воде только при нагревании до 95-100 °C. Горячий раствор является вязким, а по мере остывания превращается в желейную, гелеобразную массу. В своём составе агар-агар имеет до 4 % минеральных солей, около 10-20 % воды и 70-80 % полисахаридов.
Способность питательной среды застывать до желейной массы является очень важным для развития зародышей орхидей свойством, и если по каким бы то ни было причинам приготовленный вами раствор остыл и остался жидким, его нельзя использовать в дальнейшей работе, так как семена в нём просто напросто «утонут» и не смогут развиваться дальше. Слишком «твёрдая» консистенция также не принесёт желаемого результата, так как будет затруднять развитие в первую очередь корневой системы зародышей. В виду всего выше сказанного настоятельно рекомендуется чётко придерживаться указанных в инструкциях (рецептурах) дозировок как самого агар-агара, так и дистиллированной воды, в которой он будет разбавлен.
ОСНОВНЫМИ КОМПОНЕНТАМИ питательной среды являются:
- сахар
- вода
- агар-агар
В зависимости от потребностей тех или иных видов орхидей в рецептуры питательных сред вводят и другие, необходимые для развития молоденьких растений компоненты.
Питательную среду для семенного размножения орхидей можно купить уже готовой (специализированные магазины по продаже химических реактивов) или же приготовить самому. Так например, КЛАССИЧЕСКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА «BURGEFF EG-1» для выращивания различного рода орхидей будет выглядеть следующим образом:
- Для СИМПОДИАЛЬНЫХ ОРХИДЕЙ (Cattleya, Dendrobium, Oncidium и др.)
Часть А:
Нитрат кальция Ca(NO3)2 — 1 г
Сульфат аммония (NH4)2SO4 — 0,25 г
Сульфат магния MgSO4 * 7 H2O — 0,25 г
Сульфат железа FeSO4 * 7 H2O — 0,02 г
Часть Б:
Фосфат кальция K2HPO4 — 0,25 г
«Кислый» фосфат калия KH2PO4 — 0,25 г
Глюкоза — 10 г
Лавулоза (фруктовый [плодовый] сахар) — 10 г
Агар-агар — 10 (12 или 15) г
Дистиллированная вода — 1.000 мл
Обе части готовятся отдельно и смешиваются только перед закипанием агар-агара. Кислотность состава должна быть на уровне от 5,1 до 5,5 pH.
- Для МОНОПОДИАЛЬНЫХ ОРХИДЕЙ (Phalaenopsis, Vanda и п.д.)
Нитрат кальция Ca(NO3)2 — 1 г
Сульфат магния MgSO4 * 7 H2O — 0,3 г
Дигидрофосфат калия KH2PO4 — 0,4 г
Цитрат железа FeC6H5O7 + 3 H2O — 0,2 г
Цитрат калия K3C6H5O7 — 0,35 г
Сульфат аммония (NH4)2SO4 — 0,7 г
Декстроза — 20 г
Агар-агар 14 г
Дистиллированная вода 1.000 мл
Кислотность состава должна быть на уровне около 5,1 pH.
- Для НАЗЕМНЫХ ОРХИДЕЙ (Paphiopedilum)
Сульфат аммония (NH4)2SO4 — 0,06 г
Нитрат аммония NH4NO3 — 0,37 г
Нитрат калия KNO3 — 0,4 г
Дигидрофосфат калия KH2PO4 — 0,3 г
Нитрат магния Mg(НO3)2 * 6 H2O — 0,11 г
Сульфат железа FeSO4 * 7 H2O — 0,02 г
Фруктоза — 10 г
Декстроза — 10 гь
Агар-агар — 14 г
Дистиллированная вода — 1.000 мл
Кислотность состава должна находиться на уровне от 5 до 5,2 pH.
Кроме того, в процессе приготовления питательной среды не менее важную роль играет добавление раствора следующих МИНЕРАЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ:
Сульфат цинка ZnSO4 — 1 г
Борная кислота H3BO3 — 1 г
Сульфат марганца (II) MnSO4 * 4 H2O — 0,1 г
Сульфат меди (II) CuSO4 * 5 H2O — 0,03 г
Хлорид алюминия AlCl3 — 0,03 г
Хлорид никеля NiCl2 * H2O — 0,03 г
Иодид калия KJ — 0,01 г
Дистиллированная вода — 1.000 мл
Компоненты смешиваются и полученный раствор добавляется из расчёта 1-2 мл на 1 л питательной среды.
Всё чаще в последнее время при посадке семян орхидей в питательные среды добавляют НАТУРАЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА, способствующие более быстрому развитию зародышей орхидей. Они могут быть как животного, так и растительного происхождения.
Среди добавок ЖИВОТНОГО происхождения выделяют:
- Эмульсию, приготовленную на основе РЫБНОЙ МУКИ,
- ПЕПТОН (крупный белковый фрагмент, образующийся под действием ферментов на белки на начальных стадиях процесса переваривания белков),
- ТРИПТОН (соевый бульон).
В отличие от них добавки РАСТИТЕЛЬНОГО происхождения являются не только питательными, но и биологически активными. Наиболее важными среди них:
- АНАНАСОВЫЙ СОК: В питательные среды добавляют как свежевыжитый, так и консервированный, несладкий ананасовый сок, который способствует более быстрому развитию протокормов любых видов орхидей, а также предотвращает почернение питательной среды, вызванные образованием фенола при размножении таких орхидей, как Phalaenopsis. На 1 л питательной среды рекомендуется добавлять 100 мл ананасового сока.
- БАНАНОВЫЙ МУСС: Для приготовления бананового мусса используются только зелёные (не обработанные этиленом) бананы, которые необходимо растолочь (без применения металлических приборов) до кашеобразной формы и добавить в питательную среду из расчёта от 50 до 100 г на 1 л раствора.
- БЕРЁЗОВЫЙ СОК: Собирается в весеннее время и добавляется в питательную среду в чистом виде из расчёта 100 мл на 1 л раствора.
- КОКОСОВОЕ МОЛОКО (КОКОСОВАЯ ВОДА): В технологии размножения орхидей используется кокосовое молоко неспелых кокосовых орехов, стерильное и богатое различного рода минералами и сахаром. Добавляют его из расчёта 50-100 мл на 1 л раствора.
Помимо выше обозначенных также при приготовлении питательной среды используются соки из апельсинов, томатов, яблок, сока деревьев грецких орехов и экстракт каштановой муки. Однако, их воздействие на рост протокормов незначителен.
Все компоненты питательной среды (согласно инструкции) насыпают в стеклянный сосуд и заливают теплой дистиллированной водой, регулярно помешивая (не металлической кухонной взбивалкой) для более быстрого растворения. В обязательном порядке нужно будет измерить КИСЛОТНОСТЬ полученного раствора, которая всегда должна находится на уровне от 4,9 до 5,9 pH (максимально 6,5 pH).
Если питательная среда получилась ОЧЕНЬ КИСЛОЙ (ниже 4,9 pH), то ПОВЫСИТЬ pH поможет:
- сода (NaOH),
- гидрокарбонат натрия (NaHCO3),
- или аммиак (NH3).
В случаях же СЛИШКОМ ВЫСОКОГО pH (выше 6-6,5 pH) для его ПОНИЖЕНИЯ можно использовать:
- соляную кислоту (HCI),
- лимонный или ананасовый сок,
- серную кислоту (H2SO4),
- азотную кислоту (HNO3),
- или уксус.
Измерять кислотность лучше всего у раствора комнатной температуры, так как горячая питательная среда очень часто показывает более заниженные показатели (особенно, если измерение производится не цифровым прибором, а лакмусовыми бумажками). Компоненты, влияющие на кислотность питательной среды, нужно добавлять понемножку, каждый раз делая всё новые и новые замеры pH.
Более трудоёмкий и длительный по времени вариант приготовления питательного раствора предусматривает предварительное набухание агар-агара в холодной воде (несколько часов) с последующим доведением его до кипения и добавлением раствора солей. В виду того, что во время последующей стерилизации раствора вам понадобится повторное закипание среды, использовать данный вариант приготовления рекомендуется только, если он указан в инструкции.
Следующий шаг заключается в разливании питательной среды по коническим колбам, пробиркам или каким бы то ни было другим стеклянным сосудам (банкам). Многолетняя практика посадки семян орхидей показала, что лучше всего для этих целей использовать конические колбы Э́рленме́йера. Они достаточно устойчивые, не теряют равновесие, питательная среда распределяется равномерно, конденсат не скапливается в верхней части и всегда стекает по стенкам вниз, что в свою очередь предотвращает излишнюю потерю влаги. Кроме того, движение различного рода инфекций от ватного тампона (крышки) до питательной среды наиболее длинный (в сравнению с другими сосудами).
Перед использованием колбы и пробирки ополаскивают в холодной воде (без применения моющих средств), а если они ещё совсем новые и находятся в оригинальной упаковке, то сразу же готовы к употреблению. Полностью высушивать сосуд не нужно, достаточно просто дать лишней воде самой стечь.
На одну 100 мл коническую колбу достаточно 30 мл питательной среды (это примерно слой толщиной около 2 см), т.е. 100 мл раствора поместится примерно в 3 колбах. Если питательная среда содержит плохо растворимые элементы (например, уголь), то при разливании готового раствора в пробирки или конические колбы все нерастворимые частицы нужно будет (помешивая) распределить по всем сосудам в одинаковой пропорции. Ни в коем случае не следует оставлять остатки среды в верхней части сосудов, так как позднее ватный тампон может из-за них приклеится, что очень сильно затруднит его вытаскивание или же откроет пути для проникновения внутрь различного рода грибковых и бактериальных инфекций.
Идеальным ватным тампоном для 100 конической колбы является тампон весом около 2,5 г, он наиболее плотно закупоривает вход (выход) колбы.
После того, как сосуды наполнены и закрыты их СТЕРИЛИЗУЮТ около 15-20 минут при температуре 121 °C в пароварке или скороварке. На дно скороварки наливается вода, затем устанавливается специальная решётка (должна быть в комплекте, так как необходима для приготовления пищи на пару) и выставляются сосуды со средой. Менее удачный, но тем не менее используемый на практике метод стерилизации заключается в том, что колбы (пробирки и т.п.) укладываются в кастрюлю с водой и кипятятся около 20-25 минут. При данном способе обработки имеет место большая потеря влаги и менее эффективно удаление микроорганизмов, способных вызывать в дальнейшем различного рода грибковые и бактериальные инфекции. Как правило, остывшую питательную среду нужно будет через сутки прокипятить ещё раз.
В заключении стерилизации колбы (пробирки и т.п.) нужно ОХЛАДИТЬ (при комнатной температуре). Для этих целей их можно либо оставить в пароварке, либо аккуратно достать, накрыть фольгой или салфетками, уложить в горизонтальном положении, если это конические колбы, или же поместить под углом 45 °, прислонив к чему-либо, если это пробирки.
Для того, чтобы убедиться, что стерилизация питательной среды прошла успешно, перед использованием её нужно хотя бы на 4-5 дней оставить в покое (не открывая) и посмотреть, не появится ли внутри, например, плесень.
Copyright © 2016 NjuTIKA